Gonadal differentiation during embryonic and fetal development of male New Zealand rabbits (Oryctolagus cuniculus) / Diferenciación gonadal durante el desarrollo embrionario y fetal de conejos machos neozelandeses (Oryctolagus cuniculus)

SUMMARY: The rabbit is considered an ideal animal model for studies that describe abnormalities in the testicles due to the similar morphogenetic mechanisms of sexual development and diseases commonly found in humans. The aim of this study was to determine the male sexual differentiation of the New Zealand rabbit (Oryctolagus cuniculus) through development. The gestational age was estimated and classified as 9, 12, 14, 16, 18, 20, 23 and 28 gestational days. The morphological and sexual determination were performed by histological analysis of the reproductive tract in the embryos and fetuses (9-28 days) as well as by immunohistochemistry- Desert hedgehog-Dhh- (testis-specific protein on Y chromosome- 16, 20, 23 days and adult rabbits). Gonads were observed from the 14th day in an undifferentiated stage and with homogeneous aspect. Sexual differentiation was observed from the 16th day with presence of cells forming gonadal cords and Dhh+ cells in the gonadal parenchyma. From the 18th gestational day testicular cords were observed, which evolved into organized seminiferous tubules. The formation of the efferent ducts and ductus deferens and epididymis was observed on the 20th and 23rd days, respectively. The differentiation of the external genitalia occurred from the 23rd days from the anogenital distance and was identified to identify the penile structures. In summary, the features of the sexual differentiation were determined by observation of the Dhh+ protein in embryos from the 16th day to adulthood, and the morphological particularities observed from the 18th gestational day, determined by differentiation of the external genitalia from the 23rd day.

RESUMEN: El conejo se considera un modelo animal ideal para estudios que describen anomalías a nivel testícular debido a que presenta mecanismos morfogenéticos similares al desa- rrollo sexual y enfermedades que se encuentran comúnmente en los seres humanos. El objetivo de este estudio fue determinar la diferenciación sexual masculina del conejo de Nueva Zelanda (Oryctolagus cuniculus) a través del desarrollo. La edad gestacional se estimó y clasificó en 9, 12, 14, 16, 18, 20, 23 y 28 días gestacionales. La determinación morfológica y sexual se realizó mediante análisis histológico del tracto reproductivo en los embriones y fetos (9 - 28 días) así como mediante inmunohistoquímica -Desert hedgehog-Dhh- (proteína testicular específica en el cromosoma Y- 16, 20, 23 días y conejos adultos). Las gónadas se observaron a partir del día 14 en un estadio indiferenciado y con aspecto homogéneo. Se observó diferenciación sexual a partir del día 16 con presencia de células formadoras de cordones gonadales y células Dhh+ en el parénquima gonadal. A partir del día 18 de gestación se observaron cordones testiculares, que evolucionaron a túbulos seminíferos organizados. La formación de los conductos eferentes, deferentes y del epidídimo se observó a los 20 y 23 días, respectivamente. La diferenciación de los genitales externos ocurrió a partir del día 23 desde la distancia anogenital y se utilizó para identificar las estructuras del pene. En conclusión, las características de la diferenciación sexual se determinaron mediante la observación de la proteína Dhh en embriones desde el día 16 hasta la edad adulta, y las particularidades morfológicas observadas a partir del día 18 de gestación, determinadas por diferenciación de los genitales externos a partir del día 23.

Immunohistochemical localization of estrogen receptor in the embryonic gonad of male quail embryo during gonadal differentiation / Localización inmunohistoquímica del receptor de estrógeno en la gónada embrionaria en el embrión de codorniz macho durante la diferenciación gonadal

In birds, male embryo the gonads develop bilateral testes, in which both left and right sides produce functional spermatozoa, whereas female embryo, only the left gonad develops into a functional ovary. Estrogen plays a key role in avian sex determination in both sexes by binding to the estrogen receptor (ER). Surprisingly, chicken estrogen receptor (cER) mRNA is expressed in both sexes; moreover; its expression is only expressed in the left male gonad. The present study aimed to localize ER protein in the left gonad of male quail embryo using immunohistochemistry. The 8-day-old male quail embryos whose embryonic sex distinguished by gonadal morphology were studied. Histology of the left male gonad displayed thin cortex containing 1 to 2 layers of the germinal epithelium, while testicular cords were observed in the medulla. ER-immunoreactive cells were only found in the germinal epithelium but not in the medulla. Localization of ER was detected in the nucleus and cytoplasm of the germinal epithelial cells. The number of ER-immunoreactive cells counted in upper, lateral, and lower regions of the germinal epithelium was 18.20±1.892, 17.60±1.887, and 16.20±1.290, respectively. This study shows the first evidence for expression of ER protein in the left male gonad of the avian embryo, indicating that ER plays a role in avian gonadal sex differentiation.

En las aves, la gónada embrionaria en los machos se desarrolla bilateralmente, ambos testículos producen espermatozoides funcionales, mientras que en el embrión hembra, sólo la gónada izquierda se convierte en un ovario funcional. El estrógeno juega un papel clave en la determinación del sexo aviar, en ambos sexos, mediante la unión al receptor de estrógeno (RE). Fuertemente los receptores de estrógenos de pollo (cRE) el ARNm se expresan en ambos sexos; además, su expresión sólo se produce en la gónada izquierda del macho. El objetivo fue localizar proteínas del RE en la gónada izquierda de embriones de codorniz macho mediante inmunohistoquímica. Se estudiaron embriones de codorniz machos a los 8 días de edad, cuyo sexo embrionario se distinguió por la morfología de las gónadas. La histología de la gónada izquierda estuvo representada por la corteza delgada que contiene de 1 a 2 capas del epitelio germinal, mientras que se observaron cordones testiculares en la médula. El RE se encontró en células inmunorreactivas del epitelio germinal, pero no en la médula. Se detectó la localización de RE en el núcleo y el citoplasma de las células epiteliales germinales. El número de células RE-inmunorreactivas en las regiones superior, lateral e inferior del epitelio germinal fue de 18,20±1,892, 17,60±1,887 y 16,20±1,290, respectivamente. Este estudio muestra la primera evidencia de expresión de la proteína de RE en la gónada izquierda del embrión aviar macho, lo que indica que el RE desempeña un papel en la diferenciación sexual de la gónada aviar.

Hermafroditismo funcional de la gónada de Fissurella crassa (Mollusca: Fissurellidae) / Functional hermaphrodite gonad in Fissurella crassa (Mollusca: Fissurellidae)

La costa del Pacífico sudoriental es el hábitat de las 13 especies de lapas descritas del subgénero Fissurella Brugière. En estas especies no existe dimorfismo sexual, los animales son dioicos, el sexo se reconoce explorando directa o indirectamente las gónadas y no tienen procesos de reversión sexual. La presencia de un organismo de Fissurella crassa con gónada formada por porciones de ovario y otras de testículo con capacidad para generar óvulos y espermatozoides, evidencia la potencialidad que los organismos de Fissurella poseen para desarrollar el hermafroditismo funcional. Sin embargo, el presente hallazgo no permite inferir si el agente desencadenante del desarrollo sincrónico funcional de la gónada hermafrodita es un factor endógeno y/o asociado a algún evento exógeno medio ambiental.

The coast of the Southeastern Pacific is the habitat for 13 species of described keyhole limpets of the subgenus Fissurella Brugière. In these species sexual dimorphism does not exist, the animals are dioicos, the sex is recognized exploring directly or indirectly the gonads and they do not have processes of sexual reversion. The presence of an organism Fissurella crassa with portions of ovary and testicle with ability to generate ova and sperms, demonstrates the potential that Fissurella's organisms possess to develop functional hermaphroditism. Nevertheless, the present find does not allow to infer if the trigger agent of the synchronous functional development of the hermaphrodite gonad is a factor endogenous and/or associated with any exogenous environmental event.

Sexo fetal: identificação ultra-sonográfica precoce / Fetal sex: early ultrasonographic identification

Objetivo: Verificar a incidência de acerto na identificação ultra-sonográfica precoce do sexo fetal. Método: Foram estudados prospectivamente 1.931 fetos, por meio de exames ultra-sonográficos transvaginais e complementados por exames transabdominais, em gestações entre nove e 12 semanas, na Clínica Obstétrica da Faculdade de Medicina da Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ) e na Clínica de Ultra-Sonografia Fórum. O falo (tubérculo genital) foi determinado como horizontal no sexo feminino e vertical no sexo masculino, através da imagem em plano sagital ao corpo fetal, e correlacionado ao sexo quando do exame morfológico realizado aós a 18ª semana de gestação. Resultados: O sexo fetal determinado pela avaliação ultra-sonográfica precoce coincidiu com o sexo avaliado em 81,7 por cento dos casos em gestações com nove semanas, em 95,5 por cento nas gestações com 10 semanas, em 92,9 por cento naquelas com 11 semanas e em 99,8 por cento nas gestações com 12 semanas. O sucesso da identificação aumenta com o progredir da gestação, obtendo-se a média global de 94,2 por cento de acerto no período estudado. O acerto no diagnóstico do sexo fetal aumenta com a experiência do operador. Conclusão: A determinação ultra-sonográfica do posicionamento do falo genital pode predizer o sexo fetal precocemente.

Purpose: To establish the percentage of correct early diagnosis of fetal gender. Methods: A prospective study was developed in a University Federal of Rio de Janeiro, Departament of Obstetrics an Gynecology and Clinic of Ultrasonographic Forum. 1,931 women underwent transvaginal and transabdominal sonography at 9-12 weeks gestation. Fetal gender was identified according to genital falo position (vertical-men or horizontal-female) at sagittal plane and confirmed after 18 weeks pregnancy, morphologic, karyotyping analysis or after birth. Results: The overall accuracy of correctly assigning fetal gender was 94,2 per cent. The sucess of identification increased with gestational age, being 81,7 per cent, 95,5 per cent, 92,9 per cent and 99,8 per cent at nine, 10, 11 and 12 weeks, respectively. The accuracy of correctly identifying fetal sex significantly changed with operator training. Conclusion: Early ultrasound can accurately determine fetal gender.

Morfogênese do testículo de embriões e fetos de vacas da raça nelore (Bos taurus indicus) / Morfogenesis of Testis From Embryos and Fetuses of Nelore Breed Cows (Bos taurus Indicus)

Este estudo teve como objetivo acompanhar o processo de desenvolvimento testicular desde a fase indiferenciada até sua completa formação. Embriões e fetos de vacas da raça nelore (Bos taurus indicus) foram obtidos em frigoríficos próximos à cidade de Uberlândia, Minas Gerais. As gônadas dos fetos e os embriões foram fixados em bouin e processados para microscópica óptica convencional. A gônada foi observada primeiramente em um embrião de 1,0 cm de comprimento. Em embriões com 2,5 cm a presença da albugínea permite a identificação do sexo. A espessura média da albugínea variou de 29,08 a 558,46 mm. Gradativamente, observou-se aumento da vascularização da albugínea e do parênquima. O mediastino encontrava-se localizado centralmente. Houve uma diminuição no espaço ocupado pelos cordões testiculares de 63,71 para 41,99% do volume total dos testículos. O seu diâmetro variou de 31,68 a 48,80 mm. O diâmetro das células germinativas (e dos seus núcleos) foi de 12,27(6,65) a 16,95 (14,21) mm, respectivamente. A quantidade de células germinativas por corte transversal de cordão diminuiu de um máximo de 2,80 para 0,76. O número total de células germinativas foi de 16 no princípio da colonização da gônada para 18,32 x 106 no final do estudo. O número de células de Sertoli por corte transversal de cordão variou de 10,00 a 16,25. Os resultados obtidos mostram que a origem e a formação dos testículos nos embriões e fetos de vacas da raça Nelore (Bos taurus indicus) ocorre de forma muito semelhante ao do que é descrito para Bos taurus taurus.

The aim of this study was to accompany the process of testicular development from the non-differentiable phase to its complete formation. Embryos and fetuses of Nelore breed cows (Bos Taurus indicus) were obtained in slaughterhouses near the Uberlandia city, Minas Gerais. The gonads and the embryos were fixed in Bouin’s fixative and afterwards processed for conventional optical microscopy. The gonadal was observed firstly in a 1.0 cm long embryo. In 2.5 cm long embryos the presence of the albuginea allows the sex identification. The mean thickness of the albuginea ranged from 29.08 to 558.45 mm. Gradually increase of vascularization of the albuginea and parenchyma is observed. The mediastinum is located centrally. There was a decrease in the space occupied by the testicular cords, from 63.71 to 41.99% of the total testes volume. Its diameter ranged from 31.68 to 48.80 mm. The diameter of germinal cells (and their nuclei) was from 12.27 (6.65) to 16.95 914.21) mm. The quantity of germinal cells by cross section of cord decreased from a maximum of 2.80 to 0.76. The total number of germinal cells was from 16 at the beginning of colonization of the gonad to 18.32 x 106 at the end of the study. The number of Sertoli’s cells by cross section of cord ranged from 10.00 to 16.25. The results obtained show that the origin and formation of testes in embryos and fetuses from Nelore breed cows (Bos taurus indicus) does occur in a very similar way to what is described for Bos taurus taurus.

Desenvolvimento morfológico dos ovários em embriões e fetos bovinos da raça Nelore / Morphological development of the ovaries in embryos and fetuses of Nelore breed

Investigaram-se os eventos morfológicos relacionados ao desenvolvimento pré-natal de ovários de 81 embriões e fetos da raça Nelore, coletados em frigoríficos, com idades variando de 26 a 240 dias pós-fecundação. Observou-se formação da crista gonádica e presença de células germinativas em seu interior aos 29 e 34 dias, respectivamente. As oogônias e folículos primordiais, ao contrário dos folículos em crescimento, apresentaram diferenças significativas de diâmetro nos vários períodos estudados. Verificou-se correlação positiva (P<0,05) entre o diâmetro das oogônias e de seus núcleos, bem como entre o diâmetro dos folículos primordiais e em crescimento com seus oócitos e respectivos núcleos. A gônada apresentou-se completamente formada aos 40 dias. Folículos primordiais, em crescimento e antrais surgiram, aproximadamente, aos 95, 140 e 180 dias, respectivamente. Na raça Nelore, a oogênese tem início e duração semelhante à de raças taurinas, mas apresenta como peculiaridade a antecipação do surgimento da foliculogênese.

Papel do cromossomo Y na diferenciaçäo gonadal / Y chromosome role in the gonadal differentiation

Os autores fazem uma revisao sobre a evoluçao dos conceitos de diferenciaçao gonadal, desde a descoberta dos cromossomos X e Y até a localizaçao da seqüência de bases, no braço curto do cromossomo Y, próximo à regiao pseudoautossômica, supostamente responsável pela diferenciaçao da gônada bipotencial a testículo. O assunto desperta grande interesse, pois nem todos os passos deste verdadeiro quebra-cabeças foram desvendados e a questao do virilismo XX ainda se acha aberta à pesquisa científica.

Cronología de la diferenciación genital en octodon degus: octodontidae, rodentia / Cronology of genital differentation in octodon degus: octodontidae, rodentia

En atención al interés por manipular la ontogenia y obtener la expresión de fenotipos atávicos o nuevos, nos preocupó precisar la cronología de la diferenciación genital en óctodon degus, un roedor de larga y peculiar gestación, verificando además, si este desarrollo corresponde a un modelo que ejemplifique el mecanismo de heterocronía. Se estudiaron esbozos pregonádicos, gónadas y genitales externos de embriones y fetos de edades conocidas, mediante técnicas histológicas: H-E, azul de alcian, P.A.S. y técnicas convencionales para microscopía electrónica. Se observó que entre 37 a 40 días de edad postcoital, se inicia la diferenciación testicular, dos a tres días después, se observan las primeras células intersticiales y externamente la aparición del tubérculo genital. A los 60 ñ 1,5 días, el testículo está más desarrollado presentando cordones seminíferos, entre los cuales se observaron células intersticiales abundantes y voluminosas, con claros signos de secreción esteroidal. El tubérculo genital ya se ha diferenciado en pene. Transcurrido el 80 por ciento del período gestacional, en los cordones seminíferos se observaron espermatogonios troncales y además, una población de células peritubulares circundando cada cordón. Las células intersticiales presentaban signos evidentes de regresión. El avanzado estado de diferenciación que alcanzan la línea germinal, compartimento peritubular y células intersticiales , separa a este roedor de los otros subordenes miomorfos y sciuromorfos, en los que la diferenciación ocurre durante la vida postnatal. El momento del inicio de las interacciones celulares para el desarrollo gonadal, es similar en los distintos subórdenes de roedores, si se toma como parámetro de comparación el análisis de sus caracteres externos, pero posteriormente, durante la ontogenia de octodon degus, se disocia la tasa de desarrollo de la gónada progresando hasta etapas más avanzadas, lo cual se puede reconocer como una expresión de heterocronía. Esta diferencia temporal podría ser responsable de las particulares características que definen a este caviomorfo como más especializado reproductivamente, largas gestaciones, camada con crías bien desarrolladas, órganos reproductivos con sofisticados dispositivos que aseguran la reproducción, todo lo cual asegura el éxito de la especie en ambientes xéricos

Conceptos recientes sobre el descenso testicular / Recent concepts of testicular descent

Se presenta una revisión de los conocimientos actuales sobre el descenso testicular. La gónada inicia su diferenciación hacia la sexta semana, orientada por el mesonefros. En la siguiente semana e l antígeno H-Y y la gonadotropina coriónica definen la organogénesis testicular. Entre las semanas octava y duodécima ocurren importantes cambios en la gónada, las estructuras mesonéfricas y el primordio o anclaje perineal, que influyen decisivamente en la estructura y la función testiculares. Durante el segundo trimestre se realiza la proliferación gubernacular y, finalmente, en las últimas doce semanas desempeñan su propia función la pared abdominal y la contracción gubernacular, influída esta última por la gonadotropinahipofisiaria fetal. El maldescenso testicular puede deberse a defectos en la organogénesis gonadal durante las primeras doce semanas, o bien originarse en imperfecciones del mecanismo de descenso a nivel de la pared abdominal o del propio gubernáculo.(au)

La gonada larval de Bufo arenarum sometida a hormona tiroidea / The larval gonad of Bufo arenarum exposed to thyroid hormones

La gónada de Bufo arenarum se presenta con características femenminas en todas las larvas dado que esta especie representa un ejemplo de raza sexual "indiferenciada". El sexo genético masculino recién se evidencia luego de la metamorfosis. A fin de comprobar la eventual vinculación entre diferenciación gonadal y hormona tiroidea, se trataron las larvas con tri-iodo-tironina. Los resultados demuestran un incremento en el número y en el grado de maduración de los ovocitos